同時(shí)還回顧了神經(jīng)干細(xì)胞移植植入治療動(dòng)物模型和臨床試驗(yàn)中各種神經(jīng)缺陷和損傷的當(dāng)前進(jìn)展。最后，還討論了神經(jīng)干細(xì)胞移植衍生的潛在優(yōu)化策略，并在不久的將來(lái)對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞移植的療法的臨床轉(zhuǎn)化提出了緊迫的挑戰(zhàn)。

最終結(jié)果得知如下：

• 神經(jīng)干細(xì)胞移植是一種很有前途的治療與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病的方法，因?yàn)樗鼈兎置诳扇苄砸蜃硬⒎只缮窠?jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。
• 利用最近的技術(shù)進(jìn)步，神經(jīng)干細(xì)胞可以從三個(gè)不同的來(lái)源獲得：從原代組織直接分離、從多能干細(xì)胞分化和從體細(xì)胞轉(zhuǎn)分化。
• 神經(jīng)干細(xì)胞移植的細(xì)胞療法用于治療動(dòng)物模型和臨床試驗(yàn)中的各種神經(jīng)缺陷和損傷已得到廣泛研究。

需要研究的問(wèn)題

• 哪種神經(jīng)干細(xì)胞推導(dǎo)策略對(duì)臨床翻譯最有效、最安全？
• 神經(jīng)干細(xì)胞移植方法如何從臨床前研究轉(zhuǎn)化為臨床試驗(yàn)？
• 在不久的將來(lái)，神經(jīng)干細(xì)胞移植的療法在臨床轉(zhuǎn)化有哪些優(yōu)化策略和緊迫的挑戰(zhàn)？

神經(jīng)系統(tǒng)疾病是難治性疾病，可引起感覺(jué)喪失、運(yùn)動(dòng)功能喪失和記憶力減退，直接威脅患者生命。目前，這些疾病的致病因素及其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。傳統(tǒng)的藥物治療用于延緩疾病進(jìn)展，不能恢復(fù)功能或再生組織。最近的研究表明，神經(jīng)干細(xì)胞移植是治療神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病、神經(jīng)細(xì)胞再生和損傷部位微環(huán)境恢復(fù)的一種很有前途的治療方式。圖1)

神經(jīng)干細(xì)胞分泌可溶性因子，包括神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子，從而保護(hù)現(xiàn)有的神經(jīng)細(xì)胞免受原位損傷。此外，它們通過(guò)定向祖細(xì)胞階段分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞，以取代丟失的神經(jīng)細(xì)胞。神經(jīng)保護(hù)或細(xì)胞替代可通過(guò)神經(jīng)再生幫助急性或慢性損傷后的神經(jīng)功能恢復(fù)。

細(xì)胞來(lái)源是神經(jīng)干細(xì)胞在臨床治療中應(yīng)用的第一個(gè)必須解決的問(wèn)題，因?yàn)樽銐蛞浦菜璧募?xì)胞劑量非常高。利用最近的技術(shù)進(jìn)步，神經(jīng)干細(xì)胞可以從三種不同的來(lái)源獲得，包括從原代組織直接提取、從多能干細(xì)胞分化和從體細(xì)胞轉(zhuǎn)分化（圖2)。

利用最近的技術(shù)進(jìn)步，神經(jīng)干細(xì)胞可以通過(guò)三種不同的方法獲得：直接從初級(jí)CNS組織中提取，包括胎兒大腦、成人大腦和脊髓組織；從多能干細(xì)胞分化而來(lái)，例如胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞；體細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化，如皮膚成纖維細(xì)胞、尿細(xì)胞和血細(xì)胞，這些細(xì)胞在臨床上很容易采集。從上述來(lái)源產(chǎn)生的神經(jīng)干細(xì)胞可以通過(guò)基因改造進(jìn)一步永生化。

神經(jīng)干細(xì)胞的分離和生成策略

從原代組織中分離和培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞：細(xì)胞分離和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的建立導(dǎo)致了有利的實(shí)驗(yàn)方法的發(fā)展，并為 NSC 研究確定了豐富的細(xì)胞來(lái)源。

多能干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞的分化：多能干細(xì)胞，包括胚胎干細(xì)胞 (ESC) 和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC)，可以通過(guò)分化產(chǎn)生所需的細(xì)胞，這是原代細(xì)胞分離的有吸引力的替代方法。一般來(lái)說(shuō)，多能干細(xì)胞的神經(jīng)分化方案可分為兩大類：胚狀體 (EB) 形成和單層培養(yǎng)。

體細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化：術(shù)語(yǔ)轉(zhuǎn)分化，也稱為譜系重編程，最初由Selman和Kafatos于1974年創(chuàng)造。在此過(guò)程中，一種類型的成熟體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為另一種類型的成熟體細(xì)胞，而無(wú)需經(jīng)歷中間多能狀態(tài)。該過(guò)程主要由譜系特異性轉(zhuǎn)錄因子 (TF) 的外源表達(dá)和化合物誘導(dǎo)。

TF誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)分化：Ding等人首先證明，多能性因子的瞬時(shí)表達(dá)與適當(dāng)?shù)纳窠?jīng)信號(hào)輸入相結(jié)合，可以成功誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞形成可擴(kuò)張的NSCs，這被稱為誘導(dǎo)NSCs (iNSCs)。這一發(fā)現(xiàn)為通過(guò)病毒介導(dǎo)的外源基因表達(dá)后的直接細(xì)胞轉(zhuǎn)分化來(lái)產(chǎn)生NSC提供了一種新策略。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的進(jìn)展

什么是神經(jīng)退行性疾病：神經(jīng)退行性疾病是由大腦或脊髓中的神經(jīng)或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞缺陷引起的，導(dǎo)致記憶力減退、認(rèn)知障礙、癡呆或身體運(yùn)動(dòng)障礙，主要包括肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）、帕金森?。≒D）、阿爾茨海默?。?AD) 和亨廷頓病 (HD)。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療漸凍癥

漸凍癥的特征是大腦皮層、腦干??和脊髓中運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的退化和喪失，從而導(dǎo)致肌肉萎縮、虛弱，并最終在5年內(nèi)死亡。人類神經(jīng)干細(xì)胞分泌神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，在ALS轉(zhuǎn)基因大鼠模型中誘導(dǎo)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的再生。

此外，人iPSCs衍生的NSCs在鞘內(nèi)或靜脈注射后有效改善神經(jīng)肌肉和運(yùn)動(dòng)單位的功能，并顯著延長(zhǎng)ALS小鼠的壽命。除了動(dòng)物模型，神經(jīng)干細(xì)胞移植治療漸凍癥多年來(lái)一直處于臨床試驗(yàn)階段。臨床結(jié)果表明這種通過(guò)脊髓注射的治療方法是安全的。

大量的研究也證實(shí)神經(jīng)干細(xì)胞移植在治療漸凍癥上具有潛在的治療效果。

美國(guó)的一項(xiàng)正在進(jìn)行的臨床實(shí)驗(yàn)分別往12例ALS患者脊柱內(nèi)注射神經(jīng)干細(xì)胞，臨床評(píng)估顯示在注射后的第6個(gè)月到第18個(gè)月，疾病惡化明顯延緩，安全性也有所保障，

后續(xù)研究仍在進(jìn)行2016年，該團(tuán)隊(duì)對(duì)椎管移植神經(jīng)干細(xì)胞的患者進(jìn)行跟蹤研究報(bào)道，結(jié)果顯示部分移植的細(xì)胞分化成神經(jīng)元，并有部分仍保留其干細(xì)胞表型；直至移植后2.5年仍檢測(cè)到有移植的細(xì)胞存活。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療帕金森病

帕金森病是一種以黑質(zhì)致密部及其紋狀體末端多巴胺神經(jīng)元丟失為特征的疾病。在PD動(dòng)物模型中，移植的人神經(jīng)干細(xì)胞刺激大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的去分化和外源生長(zhǎng)因子的分泌，從而抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化并通過(guò)調(diào)節(jié)病變微環(huán)境來(lái)減緩PD進(jìn)展。

迄今為止，一份報(bào)告已證實(shí)人類神經(jīng)干細(xì)胞 (NSCs) 可以成功植入嚙齒動(dòng)物和非人靈長(zhǎng)類PD模型的大腦中，長(zhǎng)期存活并增加多巴胺水平。此外，研究神經(jīng)干細(xì)胞致瘤潛力幾乎忽略不計(jì)，并且可安全用于臨床應(yīng)用，因此支持批準(zhǔn)基于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療帕金森病的I/IIa期研究。

陸明與其醫(yī)療團(tuán)隊(duì)對(duì)36例PD患者通過(guò)自體神經(jīng)干細(xì)胞移植的方法治療隨訪12個(gè)月后，治療總有效率為81.48％，其中顯著改善為37.04％，有效改善為44.44％，無(wú)效率為18.52％。

李強(qiáng)與其醫(yī)療團(tuán)隊(duì)對(duì)病程4-13年的13名PD患者通過(guò)提取6-12周流產(chǎn)胎兒的胚胎組織分離并培養(yǎng)后由鞘內(nèi)注射干細(xì)胞的方法在治療后記錄1H，３天，７天，30天及60天后的UPDRS總體下降8.1％－49.3％，時(shí)間越長(zhǎng)效果越明顯，說(shuō)過(guò)此療法遠(yuǎn)期效果顯著。

經(jīng)過(guò)比較，外體神經(jīng)干細(xì)胞移植的治療效果明顯優(yōu)于自體神經(jīng)干細(xì)胞移植，通過(guò)以上相關(guān)團(tuán)隊(duì)不同醫(yī)療方法來(lái)年，神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)后，帕金森病患者臨床癥狀有很大改善，生活質(zhì)量顯著提高。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療阿爾茨海默病

AD的特征是可溶性和不可溶性淀粉樣蛋白β肽水平升高。還有報(bào)道稱，AD患者的海馬神經(jīng)元線粒體水平降低。將外源性神經(jīng)干細(xì)胞移植到轉(zhuǎn)基因AD小鼠中會(huì)導(dǎo)致線粒體數(shù)量和線粒體相關(guān)蛋白表達(dá)的顯著增加，以及改善小鼠認(rèn)知功能的。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療亨廷頓病

HD是一種常染色體顯性遺傳病，可引起尾狀核萎縮，以不自主的舞蹈動(dòng)作、認(rèn)知障礙和情緒障礙為特征。通過(guò)將喹啉酸注射到嚙齒動(dòng)物和靈長(zhǎng)類動(dòng)物的紋狀體中來(lái)模擬興奮性毒性，可以建立動(dòng)物HD模型。人類胎兒神經(jīng)干細(xì)胞在移植到大鼠紋狀體后可以分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞，部分引起HD大鼠的行為和解剖學(xué)恢復(fù)。

21世紀(jì)初，有研究者將流產(chǎn)胎兒的腦細(xì)胞移植給HD患者，跟蹤研究顯示，移植的外源細(xì)胞在患者腦損傷區(qū)域存活并檢測(cè)到分化，患者的運(yùn)動(dòng)能力及認(rèn)知能力也得到提升。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷

脊髓損傷 (SCI) 是一種嚴(yán)重的身體損傷，通常會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的運(yùn)動(dòng)功能喪失和繼發(fā)性損傷。目前尚無(wú)有效的SCI常規(guī)治療方法，但在SCI小鼠模型中神經(jīng)干細(xì)胞移植可顯著改善運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)，從而表明神經(jīng)干細(xì)胞可以在體內(nèi)存活、分化和改變?cè)缙诼該p傷部位的微環(huán)境。

一項(xiàng)胎兒腦神經(jīng)干細(xì)胞移植入19例創(chuàng)傷性頸椎SCI患者的I/IIa期臨床試驗(yàn)中，17例1年后感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)，2例運(yùn)動(dòng)完全但感覺(jué)恢復(fù)不完全。沒(méi)有電線損壞的跡象；空洞或腫瘤形成；神經(jīng)功能惡化；并加劇神經(jīng)性疼痛或痙攣。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療中風(fēng)

中風(fēng)是一種急性腦血管疾病，包括缺血性和出血性中風(fēng)。據(jù)報(bào)道，移植的小鼠iPSC來(lái)源或人胎兒來(lái)源的NSC系可在缺血性和出血性中風(fēng)動(dòng)物模型中提供神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子并增加血管生成和神經(jīng)生成。

在開創(chuàng)性工作中，英國(guó)已經(jīng)啟動(dòng)了使用CTX0E03（一種永生化人類NSC系）治療缺血性中風(fēng)的I/II期臨床試驗(yàn)。招募了13名男性參加I期試驗(yàn)，其中單劑量高達(dá)2000萬(wàn)個(gè)細(xì)胞通過(guò)立體定向同側(cè)殼核注射植入，雖然神經(jīng)功能得到改善，但未觀察到不良事件。基于I期試驗(yàn)的結(jié)果，II期試驗(yàn)啟動(dòng)并仍在進(jìn)行中。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療創(chuàng)傷性腦損傷

創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）的主要機(jī)制分為局灶性腦損傷和彌漫性腦損傷，分別對(duì)應(yīng)接觸性損傷類型和加速/減速損傷類型。TBI極有可能導(dǎo)致認(rèn)知和記憶缺陷以及運(yùn)動(dòng)障礙。先前的研究得出結(jié)論，神經(jīng)干細(xì)胞移植可以穩(wěn)定TBI后的皮質(zhì)微環(huán)境。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療癲癇

癲癇是中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮和抑制失衡導(dǎo)致的大腦神經(jīng)元異常放電；這種失衡導(dǎo)致短暫的腦功能障礙，這主要與離子通道神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的變化有關(guān)。近30%的顳葉癲癇 (TLE) 患者對(duì)抗癲癇藥物有耐藥性。目前的報(bào)告表明，神經(jīng)干細(xì)胞移植可以抑制自發(fā)性癲癇發(fā)作。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦癱

腦癱(CP)是一組出現(xiàn)在兒童早期的永久性運(yùn)動(dòng)障礙，是由于發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)形成非進(jìn)行性病變所致。目前CP治療包括許多措施，但這些治療方法均不能治愈CP患者。近年來(lái)，對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦癱的安全性和有效性進(jìn)行了評(píng)估。根據(jù)目前的研究，移植血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞可以部分減緩腦損傷，并對(duì)缺氧介導(dǎo)的CP新生大鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用，從而為CP治療提供了一種新的潛在策略。

在臨床上，已發(fā)現(xiàn)將流產(chǎn)的胎兒組織來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞注射到腦癱患兒的側(cè)腦室后，運(yùn)動(dòng)發(fā)育和認(rèn)知顯著加快。

神經(jīng)干細(xì)胞移植治療新生兒缺氧缺血性腦病

缺氧缺血性腦病 (HIE) 是一種在整個(gè)大腦未完全缺乏足夠氧氣供應(yīng)時(shí)發(fā)生的病癥。最近的研究表明，通過(guò)NSC移植對(duì)新生兒腦病進(jìn)行輕度低溫治療可以減緩疾病進(jìn)展并預(yù)防與HIE相關(guān)的長(zhǎng)期損害。

基于這些臨床前研究，需要付出很多努力來(lái)轉(zhuǎn)化神經(jīng)干細(xì)胞移植技術(shù)，以便在涉及HIE患者的臨床試驗(yàn)中進(jìn)行評(píng)估。表3總結(jié)了神經(jīng)干細(xì)胞移植治療各種疾病的臨床試驗(yàn)。

狀況	移植細(xì)胞	狀態(tài)/干預(yù)結(jié)果	階段	地點(diǎn)	開始年份
肌萎縮側(cè)索硬化	脊髓來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞	單側(cè)和雙側(cè)椎管內(nèi)腰椎顯微注射安全	第一階段	美國(guó)	2011年
肌萎縮側(cè)索硬化	脊髓來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞	沒(méi)有研究結(jié)果	二期	美國(guó)	2012
肌萎縮側(cè)索硬化	胎兒腦源性神經(jīng)干細(xì)胞	改善脛骨前肌	第一階段	意大利	2012
肌萎縮側(cè)索硬化	CNS10-NPC-GDNF	招聘中	第一階段	美國(guó)	2016年
帕金森病	孤雌生殖干細(xì)胞來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞	招聘中	第一階段	澳大利亞	2015年
帕金森病	ESC 衍生的 NPC	招聘中	第一/二期	中國(guó)	2017年
帕金森病	胎兒腦源性神經(jīng)干細(xì)胞	邀請(qǐng)函	第二/第三階段	中國(guó)	2017年
多發(fā)性硬化癥	MSC 衍生的 NPC	主動(dòng)，不招人	第一階段	美國(guó)	2013
脊髓損傷	胎兒腦源性 NSPCs	安全且耐受性良好	第一/二期	韓國(guó)	2005年
脊髓損傷	MSCs 衍生的 NSCs	主動(dòng)，不招人	第一/二期	俄羅斯	2014
脊髓損傷	脊髓來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞	招聘中	第一階段	美國(guó)	2013
脊髓損傷	中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞	終止，無(wú)研究結(jié)果	二期	美國(guó)、加拿大	2014
脊髓損傷	NSC 與支架相結(jié)合	招聘中	第一/二期	中國(guó)	2016年
脊髓損傷	中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞	沒(méi)有研究結(jié)果	第一/二期	加拿大、瑞士	2011年
中風(fēng)	CTX0E03	改善神經(jīng)功能，無(wú)不良事件	第一階段	英國(guó)	2010
中風(fēng)	CTX0E03	主動(dòng)，不招人	二期	英國(guó)	2014
腦癱	胎兒腦源性NPC	改善功能發(fā)育，無(wú)延遲并發(fā)癥	北美	中國(guó)	2005年
腦癱	胎兒腦源性神經(jīng)干細(xì)胞	有不同程度好轉(zhuǎn)，無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)	北美	中國(guó)	2005年
腦癱	骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衍生的神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞	運(yùn)動(dòng)功能的最佳改善	北美	中國(guó)	2010
腦癱	神經(jīng)干細(xì)胞	主動(dòng)，不招人	北美	中國(guó)	2016年
HIE	具有來(lái)自 MSC 的旁分泌因子的 NPC	招聘中	北美	中國(guó)	2014
醫(yī)學(xué)博士	中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞	沒(méi)有研究結(jié)果	第一/二期	美國(guó)	2012
下肢缺血	CTX0E03	主動(dòng)，不招人	第一階段	英國(guó)	2013
膠質(zhì)瘤	表達(dá)大腸桿菌 CD的 NSC	沒(méi)有研究結(jié)果	第一階段	美國(guó)	2010
膠質(zhì)瘤	表達(dá)大腸桿菌 CD的 NSC	招聘中	第一階段	美國(guó)	2013
膠質(zhì)瘤	表達(dá)羧酸酯酶的神經(jīng)干細(xì)胞	招聘中	第一階段	美國(guó)	2014
膠質(zhì)瘤	載有溶瘤腺病毒的 NSC	招聘中	第一階段	美國(guó)	2017年
GBM	NPCs	主動(dòng)，不招人	第一階段	美國(guó)	2011年
IBM	神經(jīng)干細(xì)胞	終止，無(wú)研究結(jié)果	第三階段	美國(guó)	2007年